荧光显色技术在鸭坦布苏病毒LAMP检测方法中的应用及比较

摘要：

参考NCBI中已收录的鸭坦布苏病毒(DTMUV)E基因保守区域设计了6条引物,通过对反应体系中各组分和条件进行优化,建立了DTMUV环介导等温扩增(LAMP)检测体系,并应用荧光显色剂(SYBR Green Ⅰ和钙黄绿素、锰离子)对扩增产物进行可视化判定.结果显示,以SYBR GreenⅠ为染料,显色敏感性为10 copies/μL的病毒,比普通PCR高100倍;以钙黄绿素和锰离子组合作为显色剂,其显色极限为1 000 copies/μL的病毒,虽低于SYBR GreenⅠ的显色敏感性,但能有效地避免气溶胶造成的空气环境污染.结果表明,本研究建立的荧光显色LAMP体系敏感性高、能避免交叉污染,具有在科研机构、基层实验室特别是检测现场推广和应用的潜力,能够为从源头遏制该病的发生和蔓延提供有效的手段.

关键词：鸭坦布苏病毒、环介导等温扩增、荧光显色剂

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分类号：S852.659.6(动物医学（兽医学）)

资助基金：公益性行业农业科研专项经费项目201003012;创新方法专项2013IM030700;山东省农业重大应用技术创新课题

在线出版日期：2014-05-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：406-411