口蹄疫病毒表位嵌合蛋白在枯草芽胞杆菌中的分泌表达
为了将口蹄疫病毒(FMDV)中和表位展示在病毒样颗粒(VLP)表面,以猪圆环病毒2型(PCV2)衣壳蛋白为骨架,用FMDV O/Mya-98/2010毒株G-H环替换PCV2自身中和表位,构建嵌合衣壳蛋白CaO.为分泌表达CaO蛋白,在芽胞杆菌穿梭质粒pHCMC05的多克隆位点中顺次插入枯草芽胞杆菌P43启动子和中性蛋白酶B分泌信号肽(nprBsp),构建分泌型大肠杆菌-枯草芽胞杆菌穿梭质粒p7257-P43.然后将合成的CaO基因插入p7257-P43质粒nprBsp的下游,构建分泌表达质粒p7257-P43-CaO.将该质粒转化枯草芽胞杆菌WB800,氯霉素诱导表达.上清经SDS-PAGE检测,嵌合蛋白CaO在枯草芽胞杆菌中得到表达.Western-blot证实,该蛋白具有反应原性.免疫电镜可观察到直径约15 nm±2 nm的VLP,表明嵌合蛋白在体外能有效组装.
口蹄疫病毒、表位嵌合蛋白、猪圆环病毒2型、枯草芽胞杆菌
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S852.659.6(动物医学(兽医学))
国家自然科学基金资助项目31060346;农业部公益性行业农业科研专项201103008
2014-04-23(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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