副猪嗜血杆菌TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用

摘要：

根据副猪嗜血杆菌16 S rRNA基因的保守序列设计特异性引物和TaqMan探针,通过反应条件优化和特异性、敏感性、重复性试验以及对临床样品的检测,建立了副猪嗜血杆菌TaqMan实时荧光定量PCR检测方法.结果表明,该方法与猪肺炎支原体、巴氏杆菌、链球菌、葡萄球菌、大肠杆菌、沙门氏菌、肠球菌、乳杆菌、解淀粉芽孢杆菌、奇异变形杆菌以及猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒无交叉反应;标准品浓度在6.92×108～6.92×103 copies/μL范围内具有良好的线性关系,最低可检测到6.92×101 copies/μL的标准品阳性质粒;批内和批间变异系数均小于3％.临床样品检测结果表明,该方法具有敏感性高、特异性好、稳定性强和快速的优点,可用于副猪嗜血杆菌感染的早期诊断和流行病学调查以及副猪嗜血杆菌的定量分析.

关键词：副猪嗜血杆菌、TaqMan实时荧光定量PCR、16 S rRNA基因、早期诊断、流行病学调查

所属期刊栏目：43

分类号：S852.612(动物医学（兽医学）)

资助基金：云南省重大科技专项2012ZA017;云南省现代农业生猪产业技术体系建设项目云财农[2009]171号;云南省农业科技创新工程2008LA019

在线出版日期：2014-02-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1268-1273