四种蜱源MIF基因的原核表达及表达产物的反应原性分析

摘要：

为研究不同蜱源巨噬细胞移动抑制因子(MIF)基因的生物学特性,本研究设计了1对特异性引物,采用PCR从亚洲璃眼蜱、青海血蜱、血红扇头蜱、麻点璃眼蜱中扩增MIF基因的完整阅读框,并对该序列一级结构特征进行分析.PCR产物经BamHⅠ+EcoRⅠ双酶切后亚克隆到表达载体pGEX-4T-1上,重组质粒转入感受态细胞BL21(DE3),37℃下用1 mmol/L IPTG诱导表达,通过SDS-PAGE分析MIF基因体外的表达特征;接着用亚洲璃眼蜱全蜱血清与四种不同蜱种MIF重组蛋白进行Western-blot分析.结果显示,MIF基因完整阅读框全长351 bp,编码116个氨基酸.氨基酸比对结果显示,亚洲璃眼蜱、青海血蜱、血红扇头蜱、麻点璃眼蜱MIF基因推导的氨基酸序列与已知的长角血蜱MIF基因推导的氨基酸序列相似性分别为98％、93％、93％、92％.SDS-PAGE结果显示,诱导的MIF重组蛋白的分子质量约为38.5 ku.亚洲璃眼蜱全蜱血清与亚洲璃眼蜱MIF重组蛋白有较强的反应原性,且该血清与青海血蜱、血红扇头蜱、麻点璃眼蜱MIF重组蛋白存在交叉反应.结果表明,蜱MIF是一种良好的抗原分子.

关键词：蜱、巨噬细胞移动抑制因子、原核表达

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分类号：S852.746(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金项目31201899;甘肃省创新研究群体计划项目1210RJIA006

在线出版日期：2013-11-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1028-1034