长角血蜱MESK基因的克隆及其生物学特性分析
为进一步了解MESK基因在长角血蜱免疫应答中的作用,克隆了长角血蜱MESK基因全长序列,采用有关生物信息学软件对该基因序列的一级结构进行了分析；构建了真核表达载体pEGFP-C1-MESK,采用脂质体转染法在HEK293细胞及HeLa细胞中对其进行了表达.48h后对细胞进行裂解,用兔抗长角血蜱阳性血清与表达出的重组蛋白进行反应,以检测重组蛋白的免疫活性.结果显示,MESK基因全长为1 426 bp,包括1个1 185 bp的开放阅读框.该基因含有5个N-糖基化位点、5个豆蔻酰化位点、9个酪氨酸蛋白Ⅱ激酶磷酸化位点、1个酪氨酸蛋白激酶位点、2个cAMP和cGMP依赖性蛋白激酶磷酸化位点、1个蛋白磷酸激酶C磷酸化位点.SDS-PAGE分析及Western-blot分析表明,表达出的重组蛋白的分子质量约为71 ku,且以与兔抗长角血蜱阳性血清反应,免疫原性良好.结果表明,MESK基因可以作为一种重要的分子标记参与蜱分类的研究,在作为候选抗蜱疫苗的研究中具有重要的开发价值.
长角血蜱、MESK基因、生物信息学、克隆、真核表达
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S852.746(动物医学（兽医学）)
国家自然科学基金项目31201899;甘肃省自然科学基金项目096RJZA128
2013-11-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共6页
806-811
