猪细小病毒四川株的分离鉴定及其一步生长曲线
为了研究猪细小病毒(PPV)的增殖规律,利用PK-15细胞从流产胎儿的肝、肠系膜淋巴结和肾样品中分离到1株病毒,经PCR检测、蚀斑纯化、病毒理化试验、微量中和试验和血凝试验证实该分离株为猪细小病毒,命名为SC-L.针对PPV的VP1和NS1基因设计特异性引物,建立PPV的荧光定量PCR方法.以SC-L分离株感染PK-15细胞,感染后每隔4h分别收集感染细胞与上清液,利用荧光定量PCR方法对不同样品中的病毒DNA进行定量分析,绘制PPV SC-L的一步生长曲线.PPV SC-L株感染PK-15细胞,细胞外病毒含量在第4~20小时缓慢增加,20 h后呈对数增长,第56小时达到最大值,随后病毒含量迅速下降,在第68小时时趋于稳定;在细胞内感染4h检测到微量的病毒粒子,第4~24小时细胞内病毒缓慢增长,24 h细胞内病毒粒子呈对数增长,第44小时达到最大量,随后胞内病毒粒子逐渐降低.表明PPV在细胞内增殖到一定数量后逐步释放到细胞外,且细胞外病毒最大量高于细胞内.
猪细小病毒、实时荧光定量PCR、一步生长曲线
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S852.659.2(动物医学(兽医学))
四川省青年基金项目09ZQ026-030;教育部新世纪优秀人才支撑计划项目NCET 11-1059;四川省科技支撑项目2010NZ0112,2012NZ0001
2013-11-05(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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