Asia 1型口蹄疫病毒多抗原表位真核表达质粒的构建及表达
为了构建Asia 1型口蹄疫病毒多抗原表位真核表达质粒,采用多表位基因串联策略,合成包括口蹄疫病毒T细胞和B细胞表位基因的基因片段F,该基因片段由结构蛋白VP1上的2个B细胞表位(VP1135-159aa、VP1194-211aa)基因、非结构蛋白3A和3D上的T细胞表位(3A21-35aa、3D795-803aa)基因组成.利用限制性内切酶HindⅢ、XbaⅠ将基因片段F克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+).经酶切鉴定、序列分析正确后,利用LipofectamineTM 2000将阳性重组质粒pc-F转染至BHK-21细胞.Western-blot和IFA分析结果显示,所表达的蛋白大小约25.4 ku,能够与Asia 1型口蹄疫病毒标准兔抗血清发生特异性反应,证实所表达的蛋白具有较好的反应原性.结果表明,Asia 1型口蹄疫病毒多抗原表位真核表达质粒pc-F构建成功,且能在BHK-21细胞中正确表达.
Asia 1型口蹄疫病毒、多抗原表位、BHK-21细胞、表达
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S852.65(动物医学(兽医学))
国家高技术研究发展计划863项目2011AA10A211;甘肃省国际科技合作计划项目1011WCGA160;家畜疫病病原生物学国家重点实验室自主研究课题SKLVEB2008ZZKT008
2013-11-05(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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