猪附红细胞体TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立与应用

摘要：

为建立一种能定性与定量检测猪附红细胞体的方法,根据GenBank中猪附红细胞体的16 SrRNA基因高度保守区设计了特异性引物和探针,经各反应条件的优化,建立了一种快速检测猪附红细胞体核酸载量的TaqMan荧光定量PCR方法.结果表明,该检测方法在107～101 copies/tL具有良好的线性关系(RSq=0.999).能检测到模板的下限为30 copies,灵敏度是普通PCR检测方法的100倍.该检测方法与其他猪常见病病原体无交叉反应,具有良好的重复性.对临诊疑似猪附红细胞体感染猪血液进行了检测,其检出率比常规PCR方法高10％.表明该方法可用于临床上猪附红细胞体的检测及定量分析.

关键词：猪附红细胞体、TaqMan荧光探针、实时荧光定量PCR、临床检测

所属期刊栏目：43

分类号：S852.62(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金资助项目30860203;公益性行业农业科研专项200903036-13

在线出版日期：2013-07-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：505-509