H3N8亚型马流感病毒M1基因在昆虫细胞中的表达及活性分析
为建立H3N8亚型马流感血清学诊断方法,将H3N8亚型马流感病毒A/equine/Xinjiang/3/2007(H3N8) M1基因插入到杆状病毒转移载体pFastBac Dual中,构建重组转移质粒pFastBac Dual-M1;将pFastBac Dual-M1转化到DH10Bac感受态细胞中,通过蓝白斑筛选重组穿梭质粒rBD-M1;在脂质体转染试剂介导下将rBD-M1转染对数生长期的Sf9昆虫细胞,拯救重组杆状病毒rBV-M1;rBV-M1感染Sf9细胞后,通过Western-blotting和免疫组织化学染色进行蛋白表达分析.结果表明,获得了分子质量为27ku的特异性M1蛋白,而且该蛋白具有良好的免疫活性.M1蛋白的成功表达为以M1蛋白作为诊断抗原的研究奠定了基础.
马流感病毒、H3N8亚型、M1基因、杆状病毒表达
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S852.659.6;Q503(动物医学(兽医学))
公益性行业农业科研专项201303046;黑龙江省自然科学基金项目ZJN0702-02
2013-03-28(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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