布鲁氏菌延胡索酸水合酶与纤连蛋白和纤连蛋白溶酶原的结合活性

摘要：

依据牛型布鲁氏菌(Brucella abortus)延胡索酸水合酶(fumarate hydratase class Ⅰ,Fumhy)基因序列设计1对特异性引物,以牛型布鲁氏菌A19株基因组为模板,通过PCR扩增Fumhy基因的开放阅读框,连接到pMD18-T Simple载体上后进行序列测定和分析；将Fumhy定向克隆到表达载体pET-28a中,构建重组表达质粒pET28a-Fumhy,并转化至大肠杆菌BL21 (DE3)中,在IPTG诱导下,进行Fumhy蛋白的表达,对表达的Fumhy蛋白进行免疫原性、与纤连蛋白和纤连蛋白溶酶原结合活性检测,研究Fumhy蛋白的免疫原性及相关的生物学活性.测序结果表明,Fumhy基因全长1 620 bp,编码539个氨基酸；成功获得带有His标签的Fumhy重组蛋白His-Fumhy,大小为59 ku,与预期结果相符合.Western-blot检测结果表明Fumhy蛋白具有免疫原性,且具有与纤连蛋白和纤连蛋白溶酶原结合活性.由此推测Fumhy蛋白可能参与布鲁氏菌在体内的感染过程.

关键词：布鲁氏菌、延胡索酸水合酶、蛋白表达、纤连蛋白、纤连蛋白溶酶原、结合活性

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分类号：S852.614(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家重点基础研究发展计划973项目2010CB530202;中央级科研院所公益性研究专项2012JB05

在线出版日期：2013-03-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：30-35