山羊痘病毒SERPIN蛋白抑制宿主细胞凋亡活性的鉴定
采用PCR扩增长为1 041 bp的山羊痘病毒(GTPV) serpin基因,构建真核表达质粒pcDNA-Serpin;将其转染HeLa细胞,经G418筛选,克隆纯化、鉴定,获得1株稳定表达GTPV SERPIN蛋白的HeLa细胞株;然后通过检测凋亡诱导剂TNF-α和放线菌酮作用后的细胞形态学变化、细胞活力和caspase活性,对GTPV SERPIN蛋白抑制宿主细胞凋亡的活性进行了鉴定.序列分析结果表明,GTPV SERPIN与正痘病毒SPI-1和SPI-2的氨基酸序列同源性为36%~38%;与痘苗病毒SPI-2空间构型相近,VADC基序和P1氨基酸(天门冬氨酸)相同.细胞试验结果显示,GTPV SERPIN蛋白能抑制由TNF-α和放线菌酮诱导的细胞凋亡,抑制率达70%左右,且这种抑制作用与其下调细胞caspase-8活性有关.证实GTPV SERPIN能抑制宿主细胞凋亡,可能是GTPV的致病因子之一.
山羊痘病毒、SERPIN蛋白、细胞凋亡
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S852.659.1(动物医学(兽医学))
广西青年科学基金项目桂科青0991042
2013-03-28(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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