大肠杆菌O157 LPS单克隆抗体的制备及ELISA检测方法的建立

摘要：

以热灭活的大肠杆菌O157∶H7（E.coli O157∶H7）菌体抗原为免疫原,E.coli O157∶H7菌体结合脂多糖（LPS）为筛选抗原,应用淋巴细胞杂交瘤技术制备E.coli O157∶H7LPS单克隆抗体。采用改良过碘酸钠法制备辣根过氧化物酶（HRP）酶标抗体,并建立检测E.coli O157∶H7的双抗体夹心ELISA方法。结果,成功制备了9株稳定分泌E.coli O157∶H7LPS单克隆抗体的杂交瘤细胞,其中7F9和7G2为LPS O-特异性多糖（O-SP）单克隆抗体,与E.coli O157∶H7菌体具有较好的反应性。此双抗体夹心ELISA方法对与受试的非O157菌株没有交叉反应,对E.coli O157∶H7纯培养菌液的检出下限为3×104CFU/mL。结果表明,建立的ELISA检测方法对E.coli O157具有较高的特异性和灵敏度,该方法有望与其他方法相结合用于对E.coli O157∶H7的检测。

关键词：大肠杆菌O157∶H7、单克隆抗体、脂多糖、双抗体夹心ELISA

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分类号：S852.612(动物医学（兽医学）)

在线出版日期：2012-04-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1260-1265