牛胸腺素原α基因的原核表达与分析鉴定

摘要：

为了把牛胸腺素原α（ProTα）开发为免疫增强剂,从重组克隆载体pMD18-T-ProTα上扩增ProTα基因,分别构建和筛选出了pGEX-4T-1-ProTα、pET-30a（＋）-ProTα的BL21、BL21codon plus和Rosetta Blue（DE3）plys重组原核表达菌株,采用不同的条件组合对其进行诱导表达。结果,重组菌BL21codon plus-pET-30a（＋）-ProTα表达出约24ku和30ku两个蛋白条带,且在37℃、IPTG浓度为0.5mmol/L、诱导3h时表达量最大,重组蛋白主要以可溶性形式存在;而pGEX-4T-1-ProTα重组菌在诸多条件下都未表达出目的蛋白。纯化产物的Western-blot分析显示,重组蛋白可与兔抗人ProTα多抗发生特异性免疫反应,表明重组蛋白具有免疫学活性结构。研究结果为重组ProTα蛋白的结构与功能研究奠定了基础。

关键词：胸腺素原α、原核表达、优化、鉴定

所属期刊栏目：41

分类号：S852.42(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金;国家高技术研究发展计划（863计划）

在线出版日期：2012-04-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1242-1247