高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒NSP1蛋白重组腺病毒的构建及其对小鼠的免疫抑制作用

摘要：

利用RT-PCR扩增获得高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）SY0608株非结构蛋白基因NSP1,将其克隆至穿梭载体pShuttle-CMV,经PmeⅠ线性化后在BJ5183大肠杆菌内与腺病毒骨架载体pAdEasy-1同源重组,获得重组腺病毒载体,再经PacⅠ线性化后转染至HEK-293A细胞,获得重组腺病毒,IFA和Western-blot鉴定结果证明其可以表达NSP1。将该重组腺病毒2次接种ICR小鼠,每次间隔2周,于免疫后不同时间取脾淋巴细胞进行体外培养,用于淋巴细胞增殖试验,并用ELISA检测IFN-γ和IL-10水平。结果显示,与野生型腺病毒（wtAd）或DMEM对照组相比,重组腺病毒rAd-NSP1组T淋巴细胞增殖指数（SI）和IFN-γ水平显著降低,IL-10水平明显增高（P〈0.05）。结果表明,高致病性PRRSV NSP1蛋白具有明显的免疫抑制作用。

关键词：高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒、NSP1、重组腺病毒、IFN-γ

所属期刊栏目：41

分类号：S852.659.6(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金;国家转基因生物新品种培育重大专项;农业部公益性行业科研专项;国家生猪产业技术体系项目

在线出版日期：2012-04-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1223-1227