新城疫病毒Mukteswar毒株反向遗传系统的建立

摘要：

为了建立新城疫病毒（NDV）Mukteswar毒株的反向遗传操作系统,根据已测定的NDV Muk-teswar毒株的全基因组序列设计了5对引物,扩增出包含全基因组cDNA的5条片段,并按一定顺序依次克隆入pSL1180载体中,然后在cDNA 5′末端插入T7启动子序列,3′末端导入具有自我剪切功能的丁肝病毒核酶序列和T7转录终止信号,构建了能转录具有精确5′和3′末端全基因组cDNA的转录载体pNDVT7。将表达核蛋白、磷酸蛋白及转录大蛋白的辅助表达载体pCIneoNP、pCIneoP和pCIneoL与pNDVT7按一定比例混合共转染BRS-T7细胞,4 d后将细胞悬液接种9日龄SPF鸡胚,结果获得了高效价的重组病毒。表明本研究建立的反向遗传系统能高效、快速拯救重组新城疫病毒毒株。

关键词：新城疫病毒、Mukteswar毒株、T7启动子、反向遗传操作系统、丁肝病毒核酶(HdvRz)

所属期刊栏目：41

分类号：S852.659.6;Q503(动物医学（兽医学）)

资助基金：公益专项2005DIB4J041

在线出版日期：2012-04-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1011-1015