同源重组技术在拯救猪繁殖与呼吸综合征病毒中的应用
为探寻猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)重组的规律和机制,在反向遗传学技术平台基础上,设计了几对作为配体和供体的复制子质粒,相应配对后共转染Mar-c145细胞,经原代或传代培养后拯救出病毒,并对拯救病毒的序列进行了比对分析。结果显示,拯救的病毒为重组子,共含有供体和配体亲本部分序列;在配体和供体的同源序列区发生了分子间同源重组;重组区域存在着一定的随机性,分别依次在ORF1的256~318 nt区域、ORF5的13970~13992 nt、ORF6的14428~14494 nt及ORF7的15135~15161 nt区域发生了重组。本研究利用同源重组技术建立的重组体系,不仅揭示病毒重组区域具有随机性,而且也为其他RNA病毒的感染性cDNA克隆的构建提供了一种方法。
猪繁殖与呼吸综合征病毒、反向遗传操作、复制子、共转染
41
S852.659.6(动物医学(兽医学))
国家自然科学基金30901078
2012-04-21(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
995-1000