跗关节免疫法抗镉单克隆抗体的制备
为快速方便地检测环境水样中的镉离子浓度,以Cd-ITCBE-KLH为免疫抗原,采用小鼠跗关节注射抗原法,分2次免疫BALB/c小鼠,每次注射20μg抗原,首次免疫后第20天收获皮下腘淋巴结,采用常规方法与骨髓瘤细胞融合,筛选细胞株,以体内诱生腹水法收获单克隆抗体,纯化后建立了镉离子的竞争ELISA检测方法。结果显示,共筛选了A2G11、A4B8B1C2、B1G5、B4F12五株杂交瘤细胞,采用其中的1株A2G11细胞株建立了镉离子的竞争ELISA检测方法,其工作曲线方程为y=-0.119 5lg”Cd2+”+0.615 4,r2=0.973 2;半数抑制浓度为1.485μg/L,检测范围(IC20~IC80)为0.029~762.676μg/L,最低检测限为0.102μg/L;与其他金属离子的交叉反应≤3.684%。表明用该方法能够有效制备抗金属离子的单克隆抗体。
单克隆抗体、腘淋巴结、跗关节免疫法、镉离子、酶联免疫吸附试验
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Q813.2(生物工程学(生物技术))
国家高技术研究发展计划863项目2007AA10Z440 2007AA10Z426
2012-04-21(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
936-940