链球菌猪主要致病种和型多重PCR检测方法的建立

摘要：

根据GenBank中登录的链球菌属保守基因（EF-TU）、猪链球菌种保守基因（GDH）、C群马链球菌兽疫亚种保守基因（M-like）、猪链球菌型特异性基因（SS1型CPS1I、SS2型CPS2J、SS7型CPS7H和SS9型CPS9H）的序列设计合成7对引物,建立了一次性在属、种、型3个水平上检测链球菌猪主要致病种和型（C群马链球菌兽疫亚种和猪链球菌1、2、7、9型）的多重PCR方法。结果显示,该多重PCR在退火温度为61℃时可一次性扩增出7条符合预期大小、序列正确的基因条带;特异性试验和准确性试验结果均符合预期,无非特异性、交叉反应、假阳性、假阴性条带出现;对16株临床分离鉴定链球菌的检测结果与细菌学鉴定及单纯PCR鉴定的符合率均为100%;敏感性为0.08ng/μL;5次重复试验的结果也完全一致。结果表明,建立的多重PCR方法具有高度特异性、准确性、敏感性和稳定性,适用于猪场链球菌病的监控和流行病学快速诊断。

关键词：链球菌、猪链球菌、马链球菌兽疫亚种、多重PCR

所属期刊栏目：41

分类号：S852.611(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金;甘肃省农业生物技术研究与应用开发项目

在线出版日期：2012-04-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：701-706