结核分枝杆菌pdhA基因的原核表达及其免疫原性分析
以结核分枝杆菌H37Rv菌株的基因组DNA为模板,采用PCR方法扩增出1 100bp的pdhA(pyruvate dehydrogenase E1component alpha subunit)基因,经限制性酶切后,与pET-28a载体连接,转化到大肠杆菌BL21中,重组菌经1mmol/L IPTG诱导表达了pdhA蛋白,并用Ni-His-resin纯化了目的蛋白,经Western-blot分析鉴定了目的蛋白的免疫原性。结果显示,重组质粒的双酶切鉴定和DNA测序均正确;SDS-PAGE和Western-blot分析结果显示,在44ku处获得一目的条带,且具有很好的免疫原性。本研究成功获得了高纯度的重组蛋白pdhA,为深入研究其功能奠定了基础。
结核分枝杆菌、pdhA基因、原核表达
41
S852.618(动物医学(兽医学))
国家重点基础研究发展计划(973计划);国家科技基础性工作专项;中央级公益性科研院所基本科研业务费专项
2012-04-21(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
697-700