抗鹅细小病毒卵黄IgG的制备及其间接ELISA检测方法的建立
采用水稀释-辛酸-硫酸铵法粗提与DEAE50纤维素层析相结合的方法从免疫鹅细小病毒(GPV)的鹅卵内提取鹅卵黄IgG,通过核酸蛋白检测仪和SDS-PAGE测定IgG的浓度和纯度后,制备兔抗鹅IgG酶标抗体;建立了针对GPV的间接EIISA抗体检测方法,确定其最佳工作条件,并对该ELISA的特异性及重复性进行检测;应用该间接ELISA检测了GPV VP3基因疫苗的免疫效果.结果显示,获得的纯化鹅卵黄IgG浓度为10 mg/mL,抗体纯度达到94.5%,兔抗鹅IgG的血清琼脂扩散效价约为1:32;经筛选确定该ELISA的最佳工作条件为:最适抗原包被浓度为20μg/mL,最适血清稀释度为1∶100,酶标抗体的最佳工作浓度为1∶3000.用建立的间接ELISA检测禽流感病毒、新城疫病毒、传染性支气管炎病毒、传染性法氏囊炎病毒、鸭肝炎病毒、鸭瘟病毒的阳性血清均为阴性,表明该方法特异性强、重复性好.经临床初步应用,能检出GPV VP3基因疫苗产生的抗体,在肌肉注射100μg与200μg基因疫苗的鹅血清中,IgG均从第14天开始上升,并分别在第35、21天达到最大值.表明本试验制备的兔抗鹅IgG酶标抗体具有较好的应用价值.
抗鹅细小病毒卵黄IgG、纯化、间接ELISA、应用
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S852.659.2(动物医学（兽医学）)
四川省教育厅自然科学研究项目;长江学者和创新团队发展计划创新团队项目;现代农业产业技术体系建设专项
2011-12-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
601-606
