羊口疮病毒环介导等温扩增快速检测方法的建立及应用

摘要：

参照GenBank中登录的羊口疮病毒(ORFV)序列(Gu320351),针对OrfV的B2L基因保守区域设计了4条引物,通过优化反应条件,建立了检测OrfV的环介导等温扩增技术(LAMP),并进行了特异性试验、敏感性试验及临床样本检测.结果显示,用建立的LAMP方法对OrfV阳性样品扩增产物的电泳呈特征性梯状条带,而绵羊痘病毒、蓝舌病病毒、口蹄疫病毒、丝状支原体山羊亚种、山羊痘病毒及健康山羊皮肤的扩增产物电泳后均无扩增条带.建立的LAMP方法对OrfV的最低检出量为5.3fg,比常规PCR方法高1000倍.表明建立的LAMP方法特异性强,敏感性高.对6份临床样本的检测结果显示,OrfV阳性检出率为83.33%(5/6),与常规PCR的符合率为100%.本试验为羊口疮病例的临床诊断和OrfV的快速检测提供了新的方法.

关键词：羊口疮病毒、环介导等温扩增技术、检测

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分类号：S852.659.1(动物医学（兽医学）)

资助基金：贵州大学引进人才科研项目2010]2260;2009]024;2011]024

在线出版日期：2011-12-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：588-592