长角血蜱新基因HL05全长序列的克隆与原核表达

摘要：

以兔抗长角血蜱饥饿雌蜱全蜱蛋白阳性血清为探针,对长角血蜱饥饿雌蜱eDNA表达文库进行免疫学筛选,获得一个阳性克隆HL05.经5”-RACE技术得到HL05基因的全长序列.HL05基因全长1053 bp,开放阅读框长540 bp,编码179个氨基酸,预计蛋白分子质量为20.01 ku.序列同源性分析表明,该基因为长角血蜱新基因.对推导的氨基酸序列进行生物信息学分析,表明HL05蛋白为分泌型蛋白,无跨膜区,具有较高的抗原指数.将该基因亚克隆后连接到原核表达载体pGEX-4T-1上,转入BL21(DE3)宿主菌,经IPTG诱导后得到大小为46 ku左右的重组蛋白,与预期大小一致.Western-blot结果显示兔抗长角血蜱成蜱全虫抗体能够识别该重组蛋白.

关键词：长角血蜱、HL05新基因、全长、序列分析、原核表达

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分类号：S852.746(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家高技术研究发展计划863项目2006AA10A207;国家基础平台项目2005DKA21205-3

在线出版日期：2011-08-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：380-386