副猪嗜血杆菌ERIC-PCR分型方法的建立及其应用

摘要：

利用ERIC序列设计1对引物,分别对PCR反应的模板量、引物浓度、DNA聚合酶用量、dNTPs浓度、退火温度等影响ERIC-PCR扩增的因素进行了探索和优化,以选择最佳的PCR反应体系及反应条件.结果显示,确定的最适引物浓度为0.166～0.333 μmol/L,DNA聚合酶的最适浓度为1.0 U/μL,模板最适用量为8 ng/μL,dNTPs为200 μmol/L.利用所建立的副猪嗜血杆菌ERIC-PCR分子生物学分型技术,对临床分离菌株的指纹图谱进行了分析,13个分离菌株的ERIC-PCR指纹图谱与15个标准血清型指纹图谱相比较,可分辨出6种血清型,并与琼脂扩散试验分型方法的结果一致.证实已建立的副猪嗜血杆菌ERIC-PCR分型方法重复性好、可比性高.

关键词：副猪嗜血杆菌、肠杆菌科基因间重复序列为引物的聚合酶链反应、分型

所属期刊栏目：41

分类号：S852.612(动物医学（兽医学）)

资助基金：广东温氏食品集团有限公司第八批科研项目C080921

在线出版日期：2011-08-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：347-350