鹅源新城疫病毒M蛋白酵母双杂交诱饵载体的构建及鉴定

摘要：

为了筛选鹅源新城疫病毒(JS/5/05/Go)M蛋白与鸡胚成纤维细胞作用的靶蛋白,应用酵母双杂交技术构建M蛋白的诱饵载体pGBKT7-M.采用RT-PCR方法从鹅源新城疫病毒中扩增了M基因片段,将其克隆到pGEM-T载体中,经测序鉴定正确后,定向克隆到酵母双杂交诱饵载体pGBKT7中,将重组诱饵载体转化酿酒酵母Y187,并验证其在酵母细胞中有无自激活和毒性作用.结果显示,成功构建了诱饵载体pGBKT7-M,并证明其对报告基因无自激活作用,且对酵母细胞无毒性.表明诱饵载体pGBKT7-M可用于酵母双杂交系统寻找与M蛋白相互作用的蛋白质.

关键词：新城疫病毒、M蛋白、酵母双杂交、诱饵栽体、自激活作用

所属期刊栏目：41

分类号：S852.659.5(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金;国家科技支撑计划;国家蛋鸡产业技术体系项目

在线出版日期：2011-08-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：331-335