多头带绦虫六钩蚴Tm45W基因的克隆表达与免疫原性分析

摘要：

为分析多头带绦虫Tm45W重组蛋白的免疫原性,利用RT-PCR技术首次从激活的多头带绦虫六钩蚴中扩增出多头带绦虫Tm45W基因.将扩增产物重组于原核表达栽体pET32a(+)中,构建pET32a-Tm45W表达栽体,转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导表达融合蛋白;表达产物进行SDS-PAGE和Western-blot分析后,将纯化的Tm45W重组蛋白免疫小鼠,用ELISA检测其血清抗体.结果显示,Tm45W基因全长为813 bp,其开放阅读框为765 bp,编码255个氨基酸,与多头带绦虫新疆株多头蚴45m基因(序列号:EU326106)的部分序列同源性为90.60%;表达的重组蛋白大小为45 ku,与脑多头蚴病羊血清的免疫印迹分析呈阳性反应;小鼠免疫后第1周血清中即可检测到抗Tm45W蛋白的特异性抗体,并于免疫后第35天达到高峰.结果表明Tm45W重组蛋白具有较好的反应活性,能引起机体较强的体液免疫反应.

关键词：多头带绦虫、六钩蚴、Tm45W基因、克隆、原核表达、免疫原性

所属期刊栏目：41

分类号：S852.734(动物医学（兽医学）)

资助基金：教育部长江学者奖励计划项目;创新团队发展计划

在线出版日期：2011-06-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：167-172