应用三磷酸核苷水解酶基因检测弓形虫方法的建立

摘要：

用Primer Explorer V4软件针对弓形虫三磷酸核苷水解酶(NTPase)基因设计了6条环介导等温扩增(LAMP)特异性引物,建立弓形虫LAMP反应体系,并进行特异性和敏感性试验.结果显示,用该反应体系30 min即可检测出弓形虫NTPase基因,产生瀑布状的特异性条带,检测极限为20 copies,敏感性比PCR高10倍.与犬新孢子虫、鹦鹉热衣原体、柔嫩艾美耳球虫、吕氏泰勒虫、羊巴贝斯虫未定种和牛巴贝斯虫间无交叉反应,且重复性良好.应用此方法,可以在攻虫后第2天于试验猪血液中检测出弓形虫,比PCR方法提前2 d.表明将弓形虫NTPase基因作为环介导等温扩增检测弓形虫的目的基因,具有特异性强、敏感性高的特点,是快速诊断弓形虫病的一种新方法.

关键词：弓形虫、三磷酸核苷水解酶基因、环介导等温扩增

所属期刊栏目：40

分类号：S852.723(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家科技支撑计划项目2007BAD40B05;公益性行业农业科研专项经费项目200803017,200903036-06

在线出版日期：2011-03-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1223-1227