猪IFN-α1重组蛋白单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及其生物学特性

摘要：

应用杂交瘤细胞技术,将用猪IFN-α1重组蛋白免疫的小鼠脾细胞经与骨髓瘤细胞融合、筛选和多次克隆化培养,成功获得了3株能稳定分泌抗猪IFN-α1的单克隆杂交瘤细胞株,分别将其命名为4E9、5B2和5H11.这3株杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体经ELISA检测,体外细胞培养上清的效价均可达到1:104,体内腹水的效价均可达1:105;SDS-PAGE分析显示,纯化的这3株单克隆抗体的重链分子质量均在60 ku以上,轻链均在30 ku以上,符合抗体IgG重链、轻链分子的大小;抗体亚类鉴定表明4E9、5B2为IgG2a类,5H11株为IgG2b类,且其抗原结合位点基本一致.细胞染色体分析表明,3株杂交瘤细胞株染色体平均数为88～96条,远高于骨髓瘤细胞或脾细胞的染色体数,从遗传角度证实获得了杂交瘤细胞株;在杂交瘤细胞的稳定性试验中,这3株细胞经多次冻存复苏和传代培养,不同代次细胞上清中的抗体效价均在1:104～1:105之间,说明该3株杂交瘤细胞分泌单克隆抗体的性能稳定.

关键词：重组猪IFN-α1蛋白、单克隆抗体、生物学特性

所属期刊栏目：40

分类号：Q511;S852.42(蛋白质)

资助基金：国家自然科学基金;甘肃省农业生物技术专项

在线出版日期：2011-01-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1057-1062