牛轮状病毒VP6蛋白间接ELISA检测方法的建立

摘要：

采用反转录一聚合酶链反应扩增了牛轮状病毒NCDV株VP6基因,将其定向插入原核表达载体pProHTa中,构建了重组表达载体pProHTa-NCDV-VP6,重组菌经IPTG诱导表达后,进行SDS-PAGE和western-blot分析,结果显示,目的蛋白获得表达,表达的蛋白大小约52 ku,且有生物活性.以纯化的重组VP6蛋白作为包被抗原,建立了检测牛轮状病毒血清抗体的间接ELISA方法,并与传统的琼脂扩散试验进行了比较.结果显示,建立的间接ELISA的敏感性较琼脂扩散试验高1×104倍.表明,该间接ELISA的建立为牛轮状病毒感染血清抗体的检测提供了一种简单、快速、灵敏的方法.

关键词：牛、轮状病毒、VP6蛋白、原核表达、酶联免疫吸附试验

所属期刊栏目：40

分类号：S852.659.4(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家”十一五”科技支撑计划项目2006BAD04A05-02

在线出版日期：2011-01-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1039-1043