日本血吸虫Sjzfp1基因的克隆表达及其表达产物的免疫效果

摘要：

以PCR技术从日本血吸虫成虫mRNA反转录制备的cDNA中克隆日本血吸虫锌指蛋白编码基因Sjzfp1以及181～786 bp的DNA片段,分别以pGEX-4T和pET-28a(+)为表达载体制备重组抗原rSjzfp1/GST和rSjzfp1-1/His.将重组抗原与206佐剂混合后免疫小鼠,观察免疫预防效果.利用实时荧光定量PCR法检测Sjzfp1在不同发育期虫体中的表达情况.结果显示,获得了日本血吸虫Sjzfp1基因全长序列,其ORF为1017 bp,编码338个氨基酸,推导的理论分子质量为38.5 ku.生物信息学分析显示Sjzfp1为日本血吸虫环形锌指蛋白或PHD型锌指蛋白.以rSjzfp1/GST和rSjzfp1-1/His免疫小鼠,诱导的减虫率分别为50.43%和17.85%,肝虫卵减少率分别为72.64%和15.96%.实时荧光定量PCR分析表明Sjzfp1基因在各发育期虫体中均有表达,其中在尾蚴和毛蚴中表达量较高,在终末宿主体内各发育期虫体中,以42 d成虫表达量最高.结果表明,Sjzfp1基因在抗血吸虫疫苗研究中具有进一步研究的潜力.

关键词：日本血吸虫、Sjzfp1基因、克隆、表达、免疫保护

所属期刊栏目：40

分类号：S852.735(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家高技术研究发展计划（863计划）;公益性行业农业科研专项

在线出版日期：2010-10-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：835-841