大肠杆菌多重耐药调控基因rob的原核表达及其表达蛋白多克隆抗体的制备

摘要：

提取阳性克隆质粒pMD18-T-rob,经Sac Ⅰ+Xho Ⅰ双酶切,回收目的片段,定向克隆到pET-28a(+)原核表达载体中,提取阳性质粒,转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,获得阳性克隆.经IPTG诱导阳性菌,收集表达产物,SDS-PAGE分析证实pET-28a-rob可成功地在大肠杆菌中表达出Rob蛋白.Westernblot分析证明,Rob蛋白具有良好的反应原性.表达出的Rob蛋白经侧带法纯化后免疫獭兔3次,制备抗Rob蛋白的多克隆抗体.通过间接ELISA方法检测抗体效价,结果表明抗体血清1:40稀释时抗体效价较高.

关键词：大肠杆菌、rob基因、原核表达、多克隆抗体

所属期刊栏目：40

分类号：S852.612(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金;吉林省科技厅项目;吉林省教育厅项目

在线出版日期：2010-08-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：486-489