柔嫩艾美耳球虫杨凌株TA4基因的克隆和原核表达

摘要：

根据国外报道的序列设计1对引物,以纯化的柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)杨凌(YL)株孢子化卵囊的总RNA为模板,用RT-PCR方法扩增出E.tenella YL株的TA4基因.序列分析表明,该序列全长741 bp,开放阅读框(ORF)为651 bp,共编码217个氨基酸,与E.tenella HT株、E.tenella BJ株和E.tenella ZJ株的TA4基因ORF序列同源性分别为99.8%、99.8%和99.27%.由此确定所获得的目的基因为E.tenella YL株TA4基因.利用生物信息学和分子生物学软件对TA4基因编码的蛋白进行结构预测,结果表明,该蛋白为一结构松散的球状蛋白.将TA4基因克隆到表达载体pET-32a中,构建重组质粒pET-TA4并在大肠杆菌BL21中进行表达,表达产物的SDS-PAGE分析结果表明,成功地表达了分子质量为41 ku的融合蛋白.

关键词：柔嫩艾美耳球虫、TA4基因、克隆、表达、结构预测

所属期刊栏目：40

分类号：S852.723(动物医学（兽医学）)

资助基金：陕西省农业攻关项目2008K02-06;985工程科技创新平台项目Z101020001

在线出版日期：2010-08-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：481-485