羊传染性脓疱病毒SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测方法的建立

摘要：

针对羊传染性脓疱病毒(ORFV)B2L基因序列设计合成了1对引物,以含有该引物扩增序列的重组质粒作为阳性标准品,建立了检测ORFV核酸的SYBR Green Ⅰ real-time PCR方法.结果显示,该方法线性关系良好,标准曲线的相关系教为0.999;检测灵敏度可达9.4×10~4copies/μL;与绵羊痘病毒(SPV)不发生交叉反应,具有良好的特异性;组内C_t值相同,组问变异系数小于2%.应用建立的方法检测20份疑似羊传染性脓疱病痛料,结果17份为阳性,同时用常规PCR进行检测,结果仅10份为阳性.结果表明,建立的实时荧光定量PCR方法具有特异、敏感、快速、定量、重复性好等优点,可初步用于ORFV的检测.

关键词：羊传染性脓疱病毒、SYBR、Green Ⅰ实时荧光定量聚合酶链反应、标准曲线

所属期刊栏目：40

分类号：S852.659.1(动物医学（兽医学）)

资助基金：吉林省科技发展计划20080217

在线出版日期：2010-05-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：270-273