A型H1N1及H3N2亚型流感病毒实时荧光RT-PCR检测方法的建立

摘要：

根据A型H1N1亚型流感病毒2009年北美变异株和H3N2亚型流行株的基因序列,设计了3套特异性引物、TaqMan探针,分别用不同的荧光基团标记,以构建的A型流感病毒及H1N1和H3N2亚型流感病毒基因重组质粒作为阳性对照,经反应条件优化,特异性、敏感性和重复性试验,筛选出3套不同的反应体系及同一个反应参数,建立了可同时检测A型流感病毒、H1N1和H3N2亚型流感病毒的实时荧光RT-PCR方法.结果表明,该方法可特异地检测H1N1(人源、猪源)、H3N2(猪源),禽流感病毒H5、H9等A型流感病毒,且与新城疫病毒、减蛋综合征病毒等其他病毒不发生交叉反应,具有特异、敏感、重复性好、快速、费用低廉等优点,试验耗时仅3 h.表明,建立的方法,一次试验即可完成A型流感病毒的初筛和H1N1、H3N2亚型流感病毒的初步确认定型.

关键词：A型流感病毒、H1N1亚型、H3N2亚型、实时荧光RT-PCR

所属期刊栏目：40

分类号：S852.659.5(动物医学（兽医学）)

资助基金：广东省农业科技攻关计划;广东省农产品安全生产关键技术研究与示范重点专项;珠海市科技计划;珠海出入境检验检疫局科技项目

在线出版日期：2010-05-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：245-251