抗鹅细小病毒VP3蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

摘要：

利用已构建好的pET-30a重组菌E.coli Rosetta(DE3)表达鹅细小病毒(GPV)VP3重组蛋白,经Ni-NTA亲和层析纯化后作为免疫原,经腹膜腔接种4～6周龄BALB/c小鼠3次,末次免疫后第3 d取小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合.用建立的间接ELISA方法进行筛选,经4次亚克隆,最终获得4株能稳定分泌抗GPV VP3单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为1F1、2A9、3B11和4A2.亚类鉴定结果显示,单抗1F1为IgG2b亚型,其余3株单抗为IgG1亚型,轻链均为κ链.经间接ELISA检测,单抗1F1、2A9、3811和4A2的腹水效价分别为1:819 200、1:1 638 400、1:409 600和1:819 200.Westernblot分析表明,获得的4株单克隆抗体均能特异性识别GPV VP3重组蛋白;间接免疫荧光试验证明,这4株单抗能够与天然GPV结合.

关键词：鹅细小病毒、VP3重组蛋白、单克隆抗体、特性鉴定

所属期刊栏目：40

分类号：S852.659.2(动物医学（兽医学）)

资助基金：黑龙江省教育厅重大项目10541z004;黑龙江省攻关项目GB01B503-02,GB04B504

在线出版日期：2010-04-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：169-173