五种禽呼吸道病病原多重PCR检测方法的建立和应用

摘要：

根据GenBank中禽流感病毒(AIV)、新城疫病毒(NDV)、鸡传染性支气管炎病毒(IBV)、鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)和鸡毒支原体(MG)的基因序列,设计了5对特异性引物,建立了分别针对鸡AIV、NDV、IBV、ILTV和MG的多重PCR鉴别诊断方法,并进行了退火温度、引物浓度和Taq DNA聚合酶浓度的优化,以及特异性、敏感性试验和临床应用.结果表明,设计的5对引物对同一样品中的RNA(AIV、NDV、IBV)和DNA(ILTV、MG)进行多重PCR扩增,均同时得到5条片段大小与设计相符的特异性片段,即268 bp(AIV)、321 bp(NDV)、457 bp(IBV)、662 bp(ILTV)和732 bp(MG);建立的多重PCR方法具有较强的特异性和较高敏感性,能检测出1 pg AIV、1 Pg NDV、10 Pg IBV的RNA和1 Pg ILTV、10 pg MG的DNA.对鸡临床样品的检测结果证明,该方法在临床诊断方面具有广阔的应用前景.

关键词：多重PCR、禽流感病毒、新城疫病毒、鸡传染性支气管炎病毒、鸡传染性喉气管炎病毒、鸡毒支原体

所属期刊栏目：40

分类号：S852.659.5(动物医学（兽医学）)

资助基金：广西柳州市科学基金项目2007031004

在线出版日期：2010-04-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：164-168