猪瘟病毒NS3蛋白的重组表达及其单克隆抗体的制备

摘要：

以含有猪瘟病毒(CSFV)石门株全长cDNA的重组质粒pOKShimen为模板,经PCR扩增获得NS3基因,利用原核表达载体pMAL-c2X、pET32a以及杆状病毒表达载体pFastBacHT B表达CSFV石门株NS3基因,获得3种重组蛋白:MBP-NS3、His-NS3和rNS3.Western-blot分析及间接免疫荧光试验证实,这3种不同载体表达的NS3蛋白均能被猪瘟阳性血清所识别.利用直链淀粉树脂柱对重组蛋白MBP-NS3进行纯化后,用其免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与SP2/0细胞融合,用间接ELISA筛选,获得2株能稳定传代并分泌针对抗CSFV NS3蛋白单克隆抗体的细胞株,命名为1D10和1H10.Western-blot分析及间接免疫荧光试验结果证明,这2株杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体均可识别CSFV NS3蛋白.

关键词：猪瘟病毒、NS3基因、单克隆抗体

所属期刊栏目：40

分类号：S852.659.6(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家重点基础研究发展计划（973计划）973;2005CB523202

在线出版日期：2010-04-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：144-149