鸡贫血病毒VP1、VP2和VP3基因酵母双杂交载体的构建及其自激活活性的鉴定

摘要：

为构建鸡贫血病毒(CAV)VP1、VP2、VP3基因酵母双杂交载体并鉴定其自激活作用,从CAV细胞传代毒M9905毒株中提取基因组DNA,利用PCR分别扩增VP1、VP2和VP3基因,采用Gateway技术将VP1、VP2和VP3基因分别克隆到酵母双杂交栽体pDEST32和pDEST22中,构建了诱饵载体及猎物载体,经酶切和PCR鉴定且测序正确后,用醋酸锂法转化酵母菌株Mav203,通过缺陷型平板SD/-Leu/-Trp/-His和SD/-Leu/-Trp/-Ura筛选以及LacZ报告基因检测载体有无自激活作用.结果表明,成功构建了诱饵载体pDEST32-VP1/VP2/VP3和捕获载体pDEST22-VP1/VP2/VP3,并证明其VP1、VP2和VP3蛋白在酵母双杂交系统中无自激活作用.研究结果为下一步利用酵母双杂交系统探索CAV VP1、VP2、VP3蛋白之间的相互作用奠定了基础.

关键词：鸡贫血病毒、蛋白相互作用、酵母双杂交载体、自激活作用

所属期刊栏目：40

分类号：S852.659.2(动物医学（兽医学）)

资助基金：现代农业产业技术体系建设专项nycytx-42-G3-01

在线出版日期：2010-04-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：111-115