单增李斯特菌单克隆抗体的制备及胶体金试纸的研制

摘要：

原核表达了单增李斯特菌(LM)ActA蛋白,检测了表达蛋白的免疫原性,制备抗ActA单克隆抗体,并测定了单克隆抗体的亚型、效价及亲和力;研制出胶体金试纸,并对试纸的特异性、敏感性、重复性、稳定性及模拟样品进行了检测.结果成功表达了ActA蛋白;ActA诱导了特异性细胞免疫和体液免疫;获得了4株抗ActA单克隆抗体,其中3株为IgG1亚类,腹水抗体效价为1:32 000～1:64 000,均为高亲和力抗体;所研制的试纸不与绵羊李斯特菌、英诺克李斯特菌同属菌及大肠杆菌、沙门氏菌、枯草杆菌、金黄色葡萄球菌、链球菌异属菌发生交叉反应;对LM纯培养物及模拟样品检测的灵敏度均为3.9×10~5CFU/mL;4℃保质期在120 d以上.表明,所研制的试纸具有快速、特异、敏感、稳定等优点,可用于LM的检测.

关键词：单增李斯特菌、ActA、原核表达、免疫原性、单克隆抗体、胶体金试纸

所属期刊栏目：40

分类号：S855.12(动物医学（兽医学）)

在线出版日期：2010-04-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：45-50