猴源环孢子虫的分离与分子鉴定
采用饱和蔗糖漂浮法、改良抗酸染色法和孢子化试验首次从广东某猴场的猴粪中分离到疑似环孢子虫卵囊.为了对其进行分子鉴定,采用巢式PCR和普通PCR方法,针对环孢子虫属18 S rDNA和ITS基因设计了3对引物,扩增其目的片段,并进行了序列分析.结果显示,卵囊大小为7.5~10 μm,经改良抗酸染色的卵囊染色程度不一,孢子化卵囊内含2个孢子囊,每个孢子囊内含有2个子孢子.通过PCR扩增,获得的18 S rDNA目的片段长712 bp,测序结果表明该猴源环孢子虫18 S rDNA基因与Cyclospora colobi、狒狒环孢子虫、人环孢子虫的相似率较高,在进化树上位于同一分支.获得的ITS-1+片段长760 bp,其中ITS-1序列高度特异,在GenBank中未见同源性序列.结果表明,从猴粪中分离的疑似环孢子虫卵囊应属于环孢子虫.
环孢子虫、18SrDNA基因、ITS-1基因、巢式PCR、猴
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S852.723(动物医学(兽医学))
国家自然科学基金30671577
2010-04-12(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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