禽流感病毒NS1抗体间接阻断ELISA检测方法的建立

摘要：

以禽流感病毒(AIV)重组NS1蛋白作为检测抗原,兔抗NS1血清为阻断抗体,建立了检测AIVNS1抗体的间接阻断ELISA方法.经筛选确定,抗原的最佳包被浓度为0.6 tμg/mL,阻断抗体的最佳稀释度为1:10 000,待检血清最佳稀释度为1:10.用该方法对42份AIV感染禽类血清样本和50份用AIV灭活疫苗免疫的禽类血清样本进行检测,结果显示,该方法的敏感性为95.2%,特异性为90.0%.交叉反应试验证明,该方法与新城疫等8种其他禽病阳性血清不发生交叉反应.临床检测结果显示,185份AIV灭活疫苗免疫禽血清样本的阴性率为89.2%,20份基因工程疫苗免疫禽血清样本的阴性率为95.0%,42份健康非免疫禽血清样本的阴性率为100%.表明,建立的间接阻断ELISA方法可用于区分AIV自然感染禽和疫苗免疫禽.

关键词：禽流感病毒、NS1蛋白、间接阻断酶联免疫吸附试验

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分类号：S852.659.5(动物医学（兽医学）)

资助基金：黑龙江省教育厅科学技术研究重大项目10541Z004;黑龙江省科技攻关项目GB04BS04;黑龙江省青年基金项目QC04C32

在线出版日期：2009-08-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：612-616