高致病性PRRSV Nsp2变异株Power SYBR Green real time RT-PCR检测方法的建立

摘要：

根据高致病性猪生殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)Nsp2变异株Nsp2基因保守区的核苷酸序列设计合成了1对引物,建立了Power SYBR Green模式的实时荧光定量RT-PCR方法,用于检测高致病性PRRSV Nsp2变异株.以pMD-Nsp2质粒为阳性对照制作标准曲线,并对该方法的特异性、敏感性、重复性进行评价.结果显示,该方法只能检测到高致病性PRRSV Nsp2变异株的特异性扩增信号;检测线性范围广,在模板浓度为3.15×109～3.15×100copies/uL具有良好的线性关系,相关系数(r2)为0.998;最低检测限为3.15 copies/uL.对25份疑似高致病性PRRS猪病料的检测结果显示,该方法与病毒分离的符合率为100%.表明,建立的Nsp2-Power SYBR Green RT-PCR方法具有良好的特异性、敏感性和重复性.

关键词：高致病性PRRSV、Nsp2变异株、Power SYBR Green实时荧光反转录聚合酶链式反应

所属期刊栏目：39

分类号：S852.659.6(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家"十一五"科技支撑计划项目2006BAD06A18-3;教育部"长江学者和创新团队发展计划"项目IRTO555

在线出版日期：2009-06-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：410-415