鸭肠炎病毒ul47基因的原核表达及其抗血清中和活性的鉴定

摘要：

提取鸭肠炎病毒(DEV)基因组DNA,采用PCR方法扩增获得了DEV ul47基因,将该基因片段定向克隆到原核表达载体pET-30a,构建重组质粒pET-30a-ul47,并转化受体菌Rosetta(DE3)pLysS中,经lPTG诱导表达,表达产物用SDS-PAGE分析.结果显示,ul47基因在大肠杆菌Rosetta中获得与预期大小相符的表达蛋白.利用Ni-NTA纯化表达蛋白,制备了兔抗DEV UL47蛋白的多克隆抗体,经琼脂双扩散测定,该抗血清效价为1:16.间接免疫荧光试验和蚀斑减数中和试验结果显示,DEV UL47蛋白主要定位于感染细胞的细胞质和细胞膜,制备的兔抗DEV UL47多克隆抗体对DEV有中和活性.

关键词：鸭肠炎病毒、ul47基因、原核表达、间接免疫荧光试验、蚀斑减数中和试验

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分类号：S852.659.1(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家"十一五"科技支撑计划项目2006BAD06A05-1

在线出版日期：2009-02-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：946-951