10.3969/j.issn.1673-4696.2008.11.005
鸭肠炎病毒UL6基因B细胞表位的预测及其主要抗原域的原核表达
采用DNAStar Protean程序,综合运用二级结构、亲水性、可塑性和抗原性指数等参数,对鸭肠炎病毒(DEV)CHv毒株UL6基因(GenBank登录号EF055890)的氨基酸序列进行了B细胞表位预测.结果显示,UL6蛋白羧基端第Thr507~Gln515、Thr521~Met529、Asp531~Phe539、Gly544~Asn562、Thr568~Gln585、Lys592~Val604、Ala681~Ala778和Tyr780~Lys790区域内含有优势B细胞表位.以DEVCHv毒株基因组作为PCR模板,利用Olig06.0软件设计了1对引物,整体扩增涵盖上述具有优势表位的基因片段,将其亚克隆到原核表达载体pET-32a(+)中,获得表达载体pET-32a-UL6M,再将其转化至E.coliRosetta(DE3),经IPTG诱导,外源基因获得了良好表达.以兔抗DEV多克隆血清进行Western-blot分析,抗血清可与该融合蛋白发生特异性反应.提示,该氨基酸片段可能含有软件预测的线性表位区.
鸭肠炎病毒、UL6基因、B细胞表位预测、抗原域、原核表达
38
S852.659.1(动物医学(兽医学))
国家"十一五"科技支撑计划项目2007206-017;国家农业科技成果转化资金项目2006GB2F000249;国家自然科学基金项目30771598;教育部"新世纪优秀人才支持计划"项目NCET-06-0818;高等学校科技创新工程重大项目培育资金项目706050;四川省基础研究项目05JY029-109/2006J13-048/07JY029-017;四川省重点建设学科项目SZD0418
2009-02-06(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共7页
939-945