微小牛蜱Bm91基因的克隆及在毕赤酵母中的表达

摘要：

从我国半饱血微小牛蜱雌性成蜱肠道和唾液腺中提取总RNA;参照GenBank中已发表的微小牛蜱Bin91基因的核苷酸序列,设计了1对特异性引物.采用RT-PCR技术扩增Bm91基因,测序正确后将其亚克隆到巴斯德毕赤酵母分泌型表达载体pPIC9K的EcoR I酶切位点,构建重组表达载体pPIC9K-Bm91.再次测序正确后将其用Sac Ⅰ内切酶线性化,电转化毕赤酵母GS115并经G418抗性筛选高拷贝重组菌株后用甲醇诱导表达.表达产物经SDS-PAGE和Western-blot分析,结果显示,Bm91基因获得了成功表达,诱导表达的培养上清液中表达出具有反应活性的83 ku的重组Bm91蛋白.

关键词：微小牛蜱、Bm91基因、分泌表达

所属期刊栏目：38

分类号：S852.746;Q786(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家"十一五"高技术研究发展计划863项目2006AA10A207;国家自然科技资源共享平台项目2005DKA21100;国家"十一五"科技支撑计划项目2007BAD40806;科技部欧盟项目;中国农业科学院杰出人才基金;欧盟EPIZONE、ICTTD3INCO510561项目;SSA-INCOME项目

在线出版日期：2008-09-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：569-575