10.3969/j.issn.1673-4696.2008.05.003
新城疫病毒F蛋白免疫活性片段的原核表达
利用已构建的新城疫病毒F基因重组质粒,通过氨基酸序列分析和InsightⅡ基因工作站的MODELER程序和同源模建技术,预测了试验株F蛋白的表面抗原分布位置.设计引物扩增了2段含有多个抗原位点的多肽片段,通过双酶切定向克隆到原核表达载体pET32a,获得了重组质粒pET32a-F1和pET32a-F2以及2个片段串联起来后克隆的重组质粒pET32a-F3.重组质粒经诱导表达并取产物进行分析,结果显示,F1、F2、F3片段均获得了融合表达.Western-blotting证实,表达产物F1、F2和F3与NDV阳性血清均具有免疫反应性.用表达的重组蛋白加免疫佐剂经皮下接种免疫鸡,免疫2次后产生较高的抗体水平,用100 LD50的超强毒株GD-05-2攻击,重组蛋白免疫组鸡可达到约70%的保护率,并可显著抑制排毒.
新城疫病毒、F蛋白、抗原表位、原核表达
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S852.659.5;Q786(动物医学(兽医学))
广东省自然科学基金项目5500-E07106;广东省科技攻关计划项目2005A20401003,2004820201030;国家高技术研究发展计划863项目2006AA10A205
2008-07-17(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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