10.3969/j.issn.1673-4696.2008.03.010
鸭源呼肠孤病毒DRV-GZ株S2基因的序列分析及其表达
采用RT-PCR方法从鸭源呼肠孤病毒DRV-GZ株中扩增出了S2基因片段,将其克隆到表达载体pET-28a(+)中,测序验证后转化入表达宿主茵RosettaTM2(DE3)plysS,进行IPTG诱导表达.结果表明,重组菌可表达出相对分子质量约为50000的重组融合蛋白,在浓度为0.6 mmol/L的IPTG诱导4 h的情况下表达效果最好.表达的蛋白以包涵体的形式存在于菌体中.表达产物经Ni柱纯化后可得到纯度较高的目的蛋白.经Western-blot分析,所纯化的蛋白能与抗呼肠孤病毒DRV-GZ株阳性血清进行特异性的免疫印迹反应,证实表达的蛋白具有较好的反应原性.
鸭源呼肠孤病毒、S2基因、克隆、原核表达、纯化、免疫印迹
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S852.659.4;Q786(动物医学(兽医学))
广东省科技计划2006A20301001;教育部跨世纪优秀人才培养计划NCET-06-0752;广东省动物防疫检疫专项粤农[2006]264号
2008-05-27(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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