禽呼肠孤病毒P17蛋白基因在大肠杆菌中的表达及其ELISA检测方法的建立

摘要：

用设计合成的1对跨越禽呼肠孤病毒(ARV)P17非结构蛋白基因完整开放阅读框(ORF)的特异性引物,对ARV S1133株进行了RT-PCR扩增.扩增产物与pGEX-4T-1原核表达载体连接后,转化大肠杆菌BL21感受态细胞.经0.2 mmol/L IPTG诱导,表达的融合蛋白分子质量为42.4 ku,占菌体总蛋白的34%.表达产物P17蛋白经不同浓度尿素纯化后,纯度达到85%.Western-blotting显示,纯化的P17蛋白能与感染ARV的阳性血清反应,说明其具有抗原性.以此重组蛋白为包被抗原初步建立了用于鉴别检测ARV活病毒感染与灭活疫苗免疫的SPF鸡血清的ELISA.

关键词：禽呼肠孤病毒、P17非结构蛋白、原核表达、酶联免疫吸附试验

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分类号：S852.659.4(动物医学（兽医学）)

资助基金：广西留学回国人员科学基金桂科回0144014和0342006;广西科技攻关项目023500124

在线出版日期：2007-11-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：777-782