柔嫩艾美球虫杨凌株表面抗原SAG10基因的克隆与原核表达

摘要：

从柔嫩艾美球虫第二代裂殖子总RNA中扩增EtSAG10基因,与pGEM-T Easy载体连接后转化大肠杆菌(E.coli)DH5α,筛选阳性克隆,扩增不含N端信号肽的编码序列,分别插入表达载体pET-32a(+)和pMAL-c2X,转化至E.coli Rosetta,以IPTG诱导表达.结果表明,pET-32a(+)-EtSAG10在E.coli Rosetta中的表达产物约占菌体总蛋白的43%,融合蛋白分子质量约为47 ku,以包涵体形式存在;而pMALc2X-EtSAG10在E.coli Rosetta中表达的重组蛋白为可溶性,表达产物约占菌体总蛋白的35%,融合蛋白分子质量约为69 ku.以表达的可溶性EtSAG10重组蛋白100μg/只肌肉注射免疫雏鸡,攻虫后以盲肠病变计分、盲肠卵囊数(OPG)、相对增重率和抗球虫指数(ACI)评价,免疫组相对盲肠卵囊产量为47.7%,抗球虫指数由86.79提高至152.13.提示,重组表达的EtSAG10可诱导雏鸡产生一定的抗球虫免疫保护.

关键词：柔嫩艾美球虫、表面抗原10、基因克隆、表达、免疫

所属期刊栏目：37

分类号：S852.723;Q78(动物医学（兽医学）)

资助基金：广东省自然科学基金05103390

在线出版日期：2007-11-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：751-755