鸡传染性贫血病毒VP1基因的克隆表达及抗原性分析

摘要：

参考已发表的鸡传染性贫血病毒(CIAV)VP1基因序列,设计并合成了2对引物,经PCR扩增获得了2个基因片段.将PCR产物克隆至pGEM-T Easy载体中,成功构建了克隆载体pGEM-CIAVVP1A和pGEM-CIAVVP1B.将上述重组质粒和原核表达载体pMXB10分别用Nde Ⅰ+EcoR Ⅰ、NdeⅠ+Xho Ⅰ双酶切,并将纯化的2个基因亚克隆至pMXB10中,构建出原核表达载体pMXB10-VP1A和pMXB10-VP1B.在0.3 mmol/L IPTG诱导下,目的基因在大肠杆菌ER2566中以分泌型得到了大量表达.Western-blot分析发现,表达蛋白具有CIAV抗原性.表达蛋白经纯化后作为包被抗原,用间接ELISA鉴定,与CIAV阳性血清均能发生特异性反应.2组蛋白免疫SPF鸡后,用全病毒ELISA试剂盒检测血清呈阳性,表明2组蛋白均可诱发机体产生抗CIAV的抗体.

关键词：鸡传染性贫血病毒、VP1基因、原核表达、酶联免疫吸附试验

所属期刊栏目：37

分类号：S8(畜牧、动物医学、狩猎、蚕、蜂)

资助基金：天津市科技培育项目043122011

在线出版日期：2007-04-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：140-144