马立克病肿瘤相关抗原间接ELISA检测方法的建立

摘要：

用自制并纯化的马立克病肿瘤相关表面抗原(MATSA)免疫SPF级BALB/c小鼠制备阳性对照抗体,以SPF级BALB/c小鼠血清为阴性对照抗体,筛选间接ELISA检测MATSA抗体的最佳反应条件.结果,包被液为0.1 mol/L pH 9.6的碳酸盐缓冲液,抗原包被浓度为4μg/mL,封闭液为含10 g/LBSA的PBST,抗血清稀释比例为1:800,酶标抗体稀释比例为1:1 200,酶标抗体作用时间为37℃温育45 min,底物作用时间为37℃温育15min,终止液为2 mol/L H2SO4,洗涤4次,每次1 min为最佳反应条件.将建立的方法应用于MATSA单克隆抗体研制过程中阳性克隆的筛选,成功获得了MATSA的单克隆抗体,表明该优化条件为间接ELISA检测MATSA抗体的最佳反应条件.

关键词：马立克病肿瘤相关表面抗原、间接ELISA、条件、筛选

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分类号：S852.43;R446.61(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家高技术研究发展计划863计划30371067;教育部霍英东教育基金会高等院校青年教师基金91033

在线出版日期：2006-08-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：538-542